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技術(shù)文章

質(zhì)粒載體的分類情況

更新時(shí)間:2023-04-12 瀏覽次數(shù):1366

質(zhì)粒載體的分類

按復(fù)制形式
分為嚴(yán)緊型和松弛型復(fù)制。
根據(jù)質(zhì)粒DNA復(fù)制與宿主之間的關(guān)系或在宿主細(xì)胞的拷貝數(shù)的多少,可以將質(zhì)粒分為兩種不同的復(fù)制類型:嚴(yán)緊型和松弛型。嚴(yán)緊型質(zhì)粒復(fù)制受宿主染色體DNA復(fù)制的嚴(yán)格控制,拷貝數(shù)較小一般只有1~3個(gè)拷貝。疏松型質(zhì)粒的復(fù)制宿主的控制比較松,在宿主中的拷貝數(shù)比較多,一般有10~200個(gè)拷貝,有時(shí)可達(dá)到700個(gè)。

按基因轉(zhuǎn)移性
分兩類:
(1)傳遞性質(zhì)粒:常為大型、嚴(yán)緊型質(zhì)粒;
(2)非傳遞性質(zhì)粒:多為小型、松弛型質(zhì)粒。

按遺傳性狀、產(chǎn)物分類
(1)抗生素抗性:如氨芐西林、氯霉素抗性;
(2)限制酶-修飾酶(R-M)系統(tǒng):如hsdR-菌株可使DNA甲基化,但不限制外源DNA;hsd-菌株為限制和甲基化雙缺陷型。

人工構(gòu)建的質(zhì)粒載體分類

高拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體
ColE1、pMB1派生質(zhì)粒具有高拷貝數(shù)的特點(diǎn)。適合大量增殖克隆基因,或需要大量表達(dá)的基因產(chǎn)物。

低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體
由 pSC101派生來(lái)的載體特點(diǎn)是分子量小的拷貝數(shù)。它有特殊的用途:當(dāng)有些被克隆的基因的表達(dá)產(chǎn)物過(guò)多時(shí)會(huì)嚴(yán)重影響寄主菌的正常代謝活動(dòng),導(dǎo)致寄主菌的死亡時(shí),就需要低拷貝的載體。

失控的質(zhì)粒載體
這是一類溫度敏感型復(fù)制控制質(zhì)粒。如pBEU1、 pBEU2。
插入失活型克隆載體。載體的克隆位點(diǎn)位于其某一個(gè)選擇性標(biāo)記基因內(nèi)部。如pDF41、pDF42。

正選擇的質(zhì)粒載體
直接選擇轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞。只有帶有選擇標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)化菌細(xì)胞才能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

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